Czy BamHI można dezaktywować termicznie?
Czy BamHI można dezaktywować termicznie?

Wideo: Czy BamHI można dezaktywować termicznie?

Wideo: Czy BamHI można dezaktywować termicznie?
Wideo: Restriction Enzymes and Recombinant DNA 2024, Może
Anonim

Chociaż NdeI Móc być ciepło dezaktywowane , BamHI -HF nie może.

Jak w ten sposób dezaktywować BamHI?

Ciepło dezaktywacja przeprowadzono w następujący sposób, aby przybliżyć typowy eksperyment. 50 µl mieszaniny reakcyjnej zawierającej odpowiedni NEBuffer, 0,5 µg DNA grasicy cielęcej i 5 lub 10 µl endonukleazy restrykcyjnej (w stężeniu handlowym) inkubowano w 37°C przez 60 minut, a następnie w 65°C lub 80°C przez 20 minut.

Podobnie, jaka jest strona restrykcyjna dla BamHI? BamHI . Ograniczenie endonukleaza BamH I związana z niespecyficznym DNA. BamH I (z Bacillus amyloliquefaciens) jest typem II ograniczenie endonukleaza, posiadająca zdolność rozpoznawania krótkich sekwencji (6 pz) DNA i swoistego rozszczepiania ich w miejscu docelowym Strona.

Czy w związku z tym muszę dezaktywować enzym restrykcyjny na gorąco?

Dezaktywacja z ograniczenie endonukleazy na ogół nie są niezbędny , ale w niektórych przypadkach może to zwiększyć wydajność transformacji.

Co to jest inaktywacja cieplna?

Ciepło - dezaktywacja ( ogrzewanie do 56°C przez 30 minut) odbywa się w celu unieczynnić dopełniacz, grupa białek obecnych w surowicach, które są częścią odpowiedzi immunologicznej. Ciepło był również używany do niszczenia mykoplazmy w surowicy.

Zalecana: