Podczas wykonywania niebiesko-białego ekranu zawierają białe kolonie bakteryjne?
Podczas wykonywania niebiesko-białego ekranu zawierają białe kolonie bakteryjne?

Wideo: Podczas wykonywania niebiesko-białego ekranu zawierają białe kolonie bakteryjne?

Wideo: Podczas wykonywania niebiesko-białego ekranu zawierają białe kolonie bakteryjne?
Wideo: 11 Najrzadszych gatunków rekinów ukrywających się w oceanie! 2024, Listopad
Anonim

I odwrotnie, białe kolonie nie może metabolizować X-Gal w celu wytworzenia niebieski barwy, ponieważ nie wytwarzają funkcjonalnej β-galaktozydazy po wchłonięciu plazmidu niosącego wstawiony DNA i rozerwaniu genu lacZ α. Te białe kolonie zawierają rekombinant bakteria i powinien być wybrany (rysunek 1).

Czy w ten sposób wszystkie białe i niebieskie kolonie zawierają plazmid?

ten niebieskie kolonie zawierają „samo” zdegradowany plazmidy że robić nie mają wstawek DNA przerywających gen lacZ. Białe kolonie składają się z bakterii, które przenoszą plazmidy które mają fragmenty wstawki DNA, które przerywają gen lacZ. Wybór zostanie dokonany na ampicylinie zawierający średni.

Podobnie, jaki jest cel niebiesko-białego ekranowania? ten niebieski – biały ekran to ekranizacja technika pozwalająca na szybkie i wygodne wykrywanie rekombinowanych bakterii w eksperymentach klonowania molekularnego opartych na wektorach. DNA będący przedmiotem zainteresowania jest ligowany do wektora.

Biorąc to pod uwagę, czym jest badanie przesiewowe niebiesko-białych kolonii?

ten niebieski - biały ekran jest ekranizacja technika pozwalająca na wykrycie udanych ligacji w klonowaniu genów opartych na wektorach. DNA będący przedmiotem zainteresowania jest ligowany do wektora. Jeśli podwiązanie się powiodło, bakteria kolonia będzie biały ; jeśli nie, kolonia będzie niebieski.

Dlaczego niektóre kolonie są niebieskie, a inne białe?

Każdy kolonia zawierający plazmid (a tym samym działający gen β-galaktozydazy) zmieni się niebieski , w wyniku aktywności β-galaktozydazy. Nazywa się to α-komplementacją. Wstawka przerwała gen β-galaktozydazy, a zatem te kolonie pozostawać biały.

Zalecana: